稳定转染细胞系的建立

本文主要介绍稳定转染的原理、步骤，稳定转染能够得到稳定高表达的细胞株，是满足活性蛋白大量制备的方法。利用哺乳动物系统生产蛋白的方式有两种：瞬时转染和稳定转染。使用哺乳动物细胞表达蛋白，细胞的选择培养也不可忽视。常用的有中国仓鼠卵巢细胞（CHO）和人胚肾细胞（HEK293）。德泰生物主要培养HEK293用于哺乳动物细胞瞬时转染，CHO细胞用于稳定转染。稳定转染通过稳定细胞系构建筛选出能够稳定表达的细胞株。针对瞬时转染，外源基因在短时间转录翻译得到的蛋白量少，1mg质粒得到1mg...

查看更多

细胞转染：瞬时转染和稳定转染及转染效率影响因素

真核蛋白表达细胞转染方式有两种：瞬时转染和稳定转染，本文的主要介绍了两者的定义和适用性及细胞转染一般步骤，影响转染效率的因素，帮助我们提高实验的成功率。在哺乳动物细胞蛋白表达实验，根据不同的实验目的，将质粒导入细胞有两种方法：瞬时转染和稳定转染。细胞转染是将外源基因导入真核细胞的过程。质粒、DNA、RNA将这些外源基因导入到真核细胞内并不容易，要跨越细胞膜的屏障进入细胞质。瞬时转染瞬时转染是指外源基因导入到细胞后得以表达，但是基因不整合到细胞的基因组上，因此不会随着细胞的生长...

查看更多

我们为什么要睡觉？

人的一生中约有三分之一的时间都在睡觉，睡眠是整个动物界生存所必须的过程。有研究表明，动物在醒着的时候会受到一定程度的神经系统损害，由此产生的受损基因和蛋白质，会在脑部堆积并引起疾病，而睡眠有助于修复这种损害并清除这些垃圾。也有实验发现，睡眠可以促进与学习和记忆巩固相关的神经塑性重组及突触的生长。但我们目前对于神经修复和重组在睡眠期间的相对作用，以及其在个体发育过程中是否会发生变化仍不清楚。近日，来自英国帝国理工大学、美国加利福尼亚大学以及德克萨斯大学的研究团队在《Scienc...

查看更多

你可知美国R&D Systems试剂盒性能的重要性！

美国R&DSystems试剂盒其基本方法是将已知的抗原或者抗体吸附在固相载体表面，并保持其免疫活性。然后抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，美国R&DSystems试剂盒盒又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同与固相载体表面的抗原或抗体起反应。美国R&DSystems试剂盒性能的重要性:①灵敏度：反映的是试剂盒检出被检物质的低量的能力，用户可根据自己样本中待检指标的量选择合适的试剂盒，如果待检...

查看更多

美国R&D Systems试剂盒在进行操作时有什么需要注意的要点呢？

R&DSystems拥有近30,000种产品，95%以上由自己研发生产。其产品包括细胞因子、ELISA试剂盒、生长因子、趋化因子、抗体、Animal-Free?蛋白、Luminex液相芯片、多因子检测固相芯片、流式细胞分析与细胞筛选、干细胞及细胞培养等；覆盖肿瘤、发育、糖生物、内分泌、免疫、神经学、蛋白酶、信号传导等学科研究领域；且每年有近2,000种新产品不断问世，以满足不同科研工作者的研究需要。美国R&DSystems试剂盒其基本方法是将已知的抗原或者抗体吸附在固相载体表...

查看更多