英诺思EasyIso™人naïve CD4 T细胞分离试剂盒（SN3104）：20分钟解锁96.8%高纯度细胞分选

　　英诺思EasyIso™人naïve CD4 T细胞分离试剂盒（SN3104）：20分钟解锁96.8%高纯度细胞分选

　　在免疫学研究和细胞治疗领域，精准获取高纯度naïve CD4 T细胞是攻克自身免疫疾病、优化CAR-T疗法的关键。英诺思EasyIso™人naïve CD4 T细胞分离试剂盒（货号SN3104）凭借无柱磁极分选技术和阴性筛选策略，实现从PBMC中快速分离目标细胞，为科研与临床提供高效解决方案。

　　一、技术原理：阴性分选保障细胞活性

　　本试剂盒采用生物素-链霉亲和素磁珠偶联系统，通过三步精准标记实现高效分离：

　　1.靶向标记非目标细胞：生物素偶联抗体特异性结合CD8⁺T细胞、B细胞、单核细胞等非naïve CD4 T细胞表面标志物

　　2.磁珠高效捕获：链霉亲和素纳米磁珠（40 nm粒径）与标记细胞结合，形成磁性复合物

　　3.无柱磁极快速分离：通过磁力架吸附非目标细胞，未标记的CD45RA⁺CD45RO⁻naïve CD4 T细胞直接富集于上清液

　　技术优势：

　　✔避免抗体与目标细胞接触，维持天然细胞状态

　　✔纳米磁珠减少机械损伤，细胞活性**>95%**

　　✔全程无需分选柱，降低样本损失风险

　　二、标准化操作流程（18-20分钟完成）

　　1.PBMC预处理

　　采用密度梯度离心法获取PBMC，调整浓度至1×10⁸cells/mL，70μm滤网过滤去除团块

　　2.抗体孵育（10分钟）

　　按100μL/mL比例加入分离鸡尾酒，常温孵育10分钟，标记非目标细胞

　　3.磁珠偶联（5分钟）

　　震荡激活链霉亲和素纳米磁珠30秒，以100μL/mL加入样本，轻柔混匀后静置

　　4.体积扩展与磁分选

　　1.流式管体系：补加FACS Buffer至2.5 mL

　　2.离心管体系：补加至7.5 mL

　　垂直置于磁力架吸附（单孔3分钟/联排5分钟），倾倒上清即获目标细胞

　　三、性能验证与核心数据

　　经流式细胞术验证（图B）：

　　分选前：PBMC中CD4⁺T细胞占比31%，其中naïve亚群仅43%

　　分选后：

　　➤CD4⁺T细胞纯度97.1%

　　➤CD45RA⁺CD45RO⁻naïve亚群纯度96.8%

　　➤细胞得率≥85%（与样本质量相关）

　　关键质控提示：

　　•使用含2%FBS的专用FACS Buffer，避免渗透压波动

　　•严格无菌操作，确保细胞培养兼容性

　　•建议搭配联排磁力架处理多样本

　　四、三大应用场景推荐

　　1.免疫机制研究：分离后的naïve CD4 T细胞可直接用于：

　　（1）TCR信号通路分析

　　（2）Th细胞分化动态追踪

　　（3）单细胞转录组测序建库

　　2.细胞治疗开发：

　　（1）CAR-T疗法中naïve T细胞的优先选用

　　（2）肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）扩增前分选

　　3.疾病模型构建：

　　（1）自身免疫疾病过继转移模型

　　（2）HIV潜伏感染机制研究

　　为何选择SN3104？

　　•时间成本锐减：比流式分选快6倍，较传统磁珠分选省30%操作步骤

　　•成本效益突出：单次处理量达1×10⁹细胞（SN3104L规格），适合大规模实验

　　•数据可重复性高：经多中心验证，批间差<5%

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